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最近进行课题设计，想验证一下microRNA和预测的靶基因是否结合。同时在靶基因3‘-练模广色改翻否课志UTR区的SNP是否影响它们的关系。这个SNP位点在种子区，推测也具有一定功能。第一步想理互管探服派斯精断克隆microRNA到表达载体，同时克隆3’-UTR区（包括野生型和吗波王乐鱼完突变型）到PGL-3control荧光素酶基因下游，双转细胞后，利用荧光素酶报告系统检测两者是否结合，升防变道谓龙snp位点是否影响结合。请问具体的实验设计：1.选取什么细胞系进行实验，是靶基因和miRNA内还须源表达高的，还是低的。细胞大敌根也混烟演节集系的基因型是否影响实验结果？2.我选用的载体是否合适，miRNA如同优草果已有慢病毒的表达载体（商品），是否可以直接利用，还是需要重新做？PGL-3control是否可以？有无合适的位点供克隆，只发现XbaI。大正领过积压织其课内对照用PGL-TK,因为不是很熟悉这套载体，不知选的任脸约制滑土洋课握范助是否合适。3.如果验证成般既袁磁化部死足功，还需什么实验短灯于开果导笑迫型补佐证，后续的功能研究如何进行？是否也需要用RNAi的方法抑制靶基因表达，再转入野生型更组妒让村凯级和突变性两种基因，看效果？

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